Генетичні методи дослідження мікроорганізмів. Полімеразна ланцюгова реакція. Її суть, практичне значення.

В основі генодіагностики лежить принцип виявлення нуклеїнових кислот в досліджуваному матеріалі. Здійснюється за допомогою реакції молекулярної гібридизації та полімеразної ланцюгової реакції.

ПЛР. Ця реакція дає можливість виявити окремі специфічні гени мікроорганізмів у досліджуваному матеріалі. В основі реакції лежить принцип ампліфікації – «розмноження» гена, що виявляється. Для виявлення конкретного гена необхідні праймери – синтетичні олігонуклеотиди, які комплементарні до специфічних ділянок гена, найчастіше до «кінцевих повторів», тобто до послідовностей нуклеотидів, які повторюються на кінцях гена. З досліджуваного матеріалу біохімічними методами виділяють ДНК і поміщають у спеціальний автоматичний прилад – ампліфікатор. При 95° вона «плавиться», тобто розкручується на 2 нитки. У систему додають праймер, необхідний для синтезу ДНК фермент(ДНК-полімераза) і нуклеотиди. При зниженні температури праймер приєднується до комплементарної ділянки гена, а ДНК-полімераза синтезує комплементарну нитку гена. Процес відбувається циклічно – нагрівання(плавлення) – охолодження(синтез). Таких циклів здійснюється до 40. В результаті нагромаджується достатня кількість ДНК конкретного гена, яку виявляють за допомогою реакції молекулярної гібридизації. Реакція унікальна за чутливістю. Дозволяє виявити поодинокі молекули ДНК(гени). Застосування: виявлення генів tox, молекулярно-біологічні дослідження(судово-медичні експертиза).

<== попередня сторінка	\|	наступна сторінка ==>
Досягнення генної інженерії, використання генно-інженерних препаратів у медицині.	\|	Хіміотерапія та хіміотерапевтичні препарати. Хіміотерапевтичний індекс. Механізм антибактеріальної дії сульфаніламіду. Роль Ерліха та Домагка в розвитку хіміотерапії.

Не знайшли потрібну інформацію? Скористайтесь пошуком google:

Генерація сторінки за: 0.005 сек.