МАРК РЕГНЕРУС ДОСЛІДЖЕННЯ: Наскільки відрізняються діти, які виросли в одностатевих союзах
РЕЗОЛЮЦІЯ: Громадського обговорення навчальної програми статевого виховання ЧОМУ ФОНД ОЛЕНИ ПІНЧУК І МОЗ УКРАЇНИ ПРОПАГУЮТЬ "СЕКСУАЛЬНІ УРОКИ" ЕКЗИСТЕНЦІЙНО-ПСИХОЛОГІЧНІ ОСНОВИ ПОРУШЕННЯ СТАТЕВОЇ ІДЕНТИЧНОСТІ ПІДЛІТКІВ Батьківський, громадянський рух в Україні закликає МОН зупинити тотальну сексуалізацію дітей і підлітків Відкрите звернення Міністру освіти й науки України - Гриневич Лілії Михайлівні Представництво українського жіноцтва в ООН: низький рівень культури спілкування в соціальних мережах Гендерна антидискримінаційна експертиза може зробити нас моральними рабами ЛІВИЙ МАРКСИЗМ У НОВИХ ПІДРУЧНИКАХ ДЛЯ ШКОЛЯРІВ ВІДКРИТА ЗАЯВА на підтримку позиції Ганни Турчинової та права кожної людини на свободу думки, світогляду та вираження поглядів
Контакти
Тлумачний словник Авто Автоматизація Архітектура Астрономія Аудит Біологія Будівництво Бухгалтерія Винахідництво Виробництво Військова справа Генетика Географія Геологія Господарство Держава Дім Екологія Економетрика Економіка Електроніка Журналістика та ЗМІ Зв'язок Іноземні мови Інформатика Історія Комп'ютери Креслення Кулінарія Культура Лексикологія Література Логіка Маркетинг Математика Машинобудування Медицина Менеджмент Метали і Зварювання Механіка Мистецтво Музика Населення Освіта Охорона безпеки життя Охорона Праці Педагогіка Політика Право Програмування Промисловість Психологія Радіо Регилия Соціологія Спорт Стандартизація Технології Торгівля Туризм Фізика Фізіологія Філософія Фінанси Хімія Юриспунденкция |
|
|||||||
Розрізання ВАС резтрикційними ферментамиГель-електрофорез Рестрикційно-ферментне картування Використовується для фізичного картування ДНК Рестрикційні ферменти ріжуть визначені сайти - паліндромні послідовності Сайти є мітками на ДНК Потім фрагменти розділяють гелем-електрофорезом Рестрикційні фрагменти ( або ендонуклеази) використовуються в фізичному картуванні для визначення подібності між ділянками ДНК. Вони також використовуються в субклонуванні для забезпечення сумісності кінців. Характерною рисою ферментів рестрикції для картування є те, що вони ріжуть на конкретних сайтах, які зазвичай складаються з паліндромних послідовностей. (Приклад показаний на слайді, показані сайти розрізання). Ці сайти представляють собою мітки на ДНК, і відстань між двома точками може бути використана в якості діагностики для визначення наявності того чи іншого регіону ДНК. Розташування ділянок визначають шляхом розрізання ДНК, а потім розділення отриманих фрагментів за допомогою процесу, відомого як гель-електрофорез. Фрагменти ДНК розділяються за розміром в електричному полі ДНК негативно заряджені: пропорційні розміру фрагмента Розділення через гелеву матрицю - агароза або акріламід Гель-електрофорез використовує електричне поле, щоб відокремити фрагменти ДНК за розміром. Фосфатні групи в основі ДНК забезпечують негативний заряд, який рівномірно розподілений, і таким чином ДНК має постійний співвідношення заряду до маси. Іншими словами, чим довша ділянка ДНК, тим більше негативний заряд. ДНК завантажується в лунки, утворені в гелевій матриці. Матриця може бути зроблено або з агарози або з акриламіду. Обидва типи матриць роблять за тим же принципом: вони перешкоджають руху ДНК, коли воно намагається рухатися до позитивного полюса електричного поля. Малі молекули здатні рухатися швидше через гель, а більші молекули більш повільно. Окремі фрагменти ДНК вирізаються рестриктазою ДНК візуалізують з бромистим етидієм - Зв'язується з ДНК і флуоресціює оранжевим Розміри фрагментів визначається на основі стандартних У даному прикладі рестрикційного картування, очищене ДНК від концентрації алкоголю в крові було оброблене одним із таких способів: Лунка 1 - нерозрізаний BAC ДНК; Лунка 2 – розрізаний рестрикцій ним ферментом Not I, який має вісім пар основ визначеного сайта і таким чином порізаний дуже рідко; Лунка 3 – розрізаний Eco RI рестріктазою; Лунка 4 – розрізаний ферментом рестрикції Hind III. Зверніть увагу на різні смуги для Eco RI-Cut ДНК і Hind III-Cut ДНК. Фрагменти ДНК візуалізували шляхом фарбування бромистим етидієм, який зв'язується з ДНК і флуоресціює жовтим при освітленні ультрафіолетовим світлом. Лунка "М" має маркер, що містить набір фрагментів ДНК відомого розміру. Положення цих маркерів фрагментів використовується для визначення розмірів фрагментів в інших лунка. Це робиться шляхом побудови відстані мігрування в порівнянні з логарифмом молекулярної маси маркерів (як в слайді). Коли потрібно визначити розмір невідомого фрагмента , його молекулярна маса може бути визначена шляхом його розміщення на цій лінії. Нижня панель показує прилад геля-електрофорезу з джерелом живлення позаду нього.
|
||||||||
|