Протягом 60-річної діяльності (1576–1636) Острозьку академію закінчило не менше як 500 учнів. Була вихована ціла плеяда духовних поводирів українського народу, вчителів, письменників, священиків, відомих культурних і освітніх діячів. Найвизначнішими постатями цієї плеяди були київські митрополити Іов Борецький та Ісайя Косинський, письменник-полеміст Іван Вишенський, визначний філолог, богослов. Письменник Мелетій Смотрицький, визначні церковні діячі: засновник скиту манявського Іов Княгиницький, архімандрит Києво-Печерської лаври Єлисей Плетенецький, ігумен Богоявленського київського братства, ректор братської школи та коректор друкарні лаври Тарасій Земка, намісник Києво-Печерської лаври та ректор Києво-Могилянської академії Ігнатій Оксентович Старушич, гетьман запорізьких козаків Петро Конашевич-Сагайдачний, педагог, письменник, філософ. Автор першого слов’яно-руського словника Лаврентій Зизаній Тутстановський.