• Гідрологія і Гідрометрія
• Господарське право
• Економіка будівництва
• Економіка природокористування
• Економічна теорія
• Земельне право
• Історія України
• Кримінально виконавче право
• Медична радіологія
• Методи аналізу
• Міжнародне приватне право
• Міжнародний маркетинг
• Основи екології
• Предмет Політологія
• Соціальне страхування
• Технічні засоби організації дорожнього руху
• Товарознавство продовольчих товарів

Хід роботи

Готують цитратну кров, додаючи 50 мкл 5,0 % розчину натрій цитрату до 500 мкл крові. Еритроцити відділяють від плазми крові шляхом центрифугування при 3 000 об/хв протягом 5 хв. Плазму відсмоктують пастерівською піпеткою або за допомогою шприца з довгою голкою. Еритроцити двічі промивають охолодженим фізіологічним розчином (0,9 % розчин натрій хлористий) при 3 000 об/хв по 5 хв. Після останього промивання та відсмоктування надосадової рідини з дна центрифужної пробірки збирають еритроцитарну масу.

У штативі закріплюють колонку у вертикальному положенні, кран біля основи колонки закривають. На дно колонки спочатку наливають 30 % розчин сахарози (на дні колонки створюють основу), а тоді 0,5 мл еритроцитарної суспензії (суспензію отримують розведенням 0,1 мл еритроцитарної маси до об’єму 1,0 мл фізіологічним розчином). Колонку залишають у вертикальному положенні 10 хв для створення природної гравітаційної диференціації клітин.

Через 10 хв колонку нахиляють під кутом 60°. По стінці обережно почергово нашаровують по 2 мл розчину сахарози починаючи з 30 % і далі відповідно: 26 %, 22 %, 18 %, 14 %, 10 %, 6 %. Пам’ятайте, що розчини сахарози мають бути зроблені на фізіологічному розчині (0,85 % розчині NаСl). Після нашарування розчинів сахарози колонку знову закріплюють вертикально. Через кілька хвилин отримують сім клітинних популяцій, які відбирають через краник в окремі пронумеровані центрифужні пробірки. Клітинні фракції двічі відмивають від розчину сахарози охолодженим фізіологічним розчином шляхом центрифугування при 8 000 об/хв протягом 5 хв. Після останнього центрифугування надосадову рідину видаляють, а осад еритроцитів ресуспендують в 1,5 мл фізіологічного розчину і використовують у подальших дослідженнях:

§ для диференціації отриманих клітинних популяцій у віковому аспекті проводять цитологічний контроль на вміст ретикулоцитів. У нефракціонованій крові міститься 1 % ретикулоцитів. У фракціонованій крові ретикулоцити виявляють у верхніх трьох фракціях – це 5, 6 і 7. У п’ятій фракції – до 7 % ретикулоцитів, у шостій – до 12 %, у сьомій – до 15 % ретикулоцитів;

§ для диференціації отриманих клітинних популяцій у віковому аспекті проводять визначення резистентності еритроцитів в отриманих фракціях до кислотного гемолітика;

§ для диференціації отриманих клітинних популяцій у віковому аспекті проводять визначення осмотичної резистентності еритроцитів в отриманих фракціях.

Читайте також:

1. II. Вимоги безпеки перед початком роботи
2. II. Вимоги безпеки праці перед початком роботи
3. III. Вимоги безпеки під час виконання роботи
4. III. Вимоги безпеки під час виконання роботи
5. Internet. - це мережа з комутацією пакетів, і її можна порівняти з організацією роботи звичайної пошти.
6. IV. Вимоги безпеки під час роботи на навчально-дослідній ділянці
7. S Визначення оптимального темпу роботи з урахуванням динаміки наростання втоми.
8. VII. Прибирання робочих місць учнями (по завершенню роботи) і приміщення майстерні черговими.
9. Аконність залишення засуджених у слідчому ізоляторі для роботи з господарського обслуговування.
10. Актуальні методи соціальної роботи
11. Актуальність проблеми професійної етики соціальної роботи
12. Алгоритм роботи прозорого моста

Переглядів: 431