МАРК РЕГНЕРУС ДОСЛІДЖЕННЯ: Наскільки відрізняються діти, які виросли в одностатевих союзах
РЕЗОЛЮЦІЯ: Громадського обговорення навчальної програми статевого виховання ЧОМУ ФОНД ОЛЕНИ ПІНЧУК І МОЗ УКРАЇНИ ПРОПАГУЮТЬ "СЕКСУАЛЬНІ УРОКИ" ЕКЗИСТЕНЦІЙНО-ПСИХОЛОГІЧНІ ОСНОВИ ПОРУШЕННЯ СТАТЕВОЇ ІДЕНТИЧНОСТІ ПІДЛІТКІВ Батьківський, громадянський рух в Україні закликає МОН зупинити тотальну сексуалізацію дітей і підлітків Відкрите звернення Міністру освіти й науки України - Гриневич Лілії Михайлівні Представництво українського жіноцтва в ООН: низький рівень культури спілкування в соціальних мережах Гендерна антидискримінаційна експертиза може зробити нас моральними рабами ЛІВИЙ МАРКСИЗМ У НОВИХ ПІДРУЧНИКАХ ДЛЯ ШКОЛЯРІВ ВІДКРИТА ЗАЯВА на підтримку позиції Ганни Турчинової та права кожної людини на свободу думки, світогляду та вираження поглядів
Контакти
Тлумачний словник Авто Автоматизація Архітектура Астрономія Аудит Біологія Будівництво Бухгалтерія Винахідництво Виробництво Військова справа Генетика Географія Геологія Господарство Держава Дім Екологія Економетрика Економіка Електроніка Журналістика та ЗМІ Зв'язок Іноземні мови Інформатика Історія Комп'ютери Креслення Кулінарія Культура Лексикологія Література Логіка Маркетинг Математика Машинобудування Медицина Менеджмент Метали і Зварювання Механіка Мистецтво Музика Населення Освіта Охорона безпеки життя Охорона Праці Педагогіка Політика Право Програмування Промисловість Психологія Радіо Регилия Соціологія Спорт Стандартизація Технології Торгівля Туризм Фізика Фізіологія Філософія Фінанси Хімія Юриспунденкция |
|
|||||||
Одержання інсуліну.Біотехнологія одержання гормонів • 2% населення Землі хворі на діабет • 20% хворих на діабет потребують ін’єкцій інсуліну • З усіх людей віком 8-12 років 0,25% хворі; 40-50 років - 3%; старші 70 років -7%. • Діабет займає третє місце після серцево-судинних і онкологічних захворювань. • Перші досліди по використанню інсуліну для лікування проведені у 1922 році. Отримання інсуліну з природної сировини Недоліки: 1. Обмеженість сировини (підшлункової залози). 2. При ін’єкціях інсуліну виділеного з підшлункової залози корови в організмі виробляються антитіла до цього інсуліну, які інактивують його, тобто зменшується тривалість біологічної дії препарату. 3. В таких препаратах є домішки інших білків які теж викликають утворення антитіл, тому в місці повторного введення препарату атрофується підшкірний жировий прошарок. Хімічний синтез інсуліну 1963 рік ФРН, США, Китай Недоліки: 1) Трудомісткий (близько 170 реакцій). 2) Важко було синтезувати дисульфідні зв’язки, тому спочатку синтезували проінсулін. Інформація про структуру інсуліну закодована в 11 хромосомі. Поліпептид А – 63 пари основ. Поліпептид В – 90 пар основ. Отримання інсуліну з використанням рекомбінантних ДНК. Перші досліди 1979 рік. Широке виробництво 1981 рік. Eli Lilly and Co. спільно з Genentech. Inc. 1. Окремий синтез генів що кодують поліпептиди (ланцюги) А і В (послідовність ДНК відтворили по амінокислотній послідовності інсуліну). 2. Вбудовування кожного гена в середину гена β-галактозидази плазміди. 3. Введення плазмід в клітину E.coli. 4. Клітини вирощують на середовищі з лактозою і в них індукується синтез β-галактозидази (цей ензим розщеплює лактозу на галактозу і глюкозу). Разом з β-галактозидазою синтезуються поліпептиди А і В приєднані до неї через залишки метіоніну. 5. Лізис бактерій і обробка бромціаном (N≡C-Br), що розщеплює білки специфічно по залишку метіоніну. Інсулін метіоніну не має і тому його поліпептиди не зруйнуються, а зруйнується β-галактозидаза. 6. Очистка поліпептидів А і В та їх об’єднання. 7. Створення дисульфідних зв’язків, для об’єднання поліпептидів А і В, було складне, тому синтезували проінсулін, який потім β-карбоксипептидазою розщепили до інсуліну. 1. Виділення з β-клітин острівців Лангерганса м-РНК, яка кодує структуру проінсуліну. 2. Синтез комплементарної ДНК на М-РНК методом зворотної транскрипції. 3. На отриманому ланцюзі ДНК синтез іншого ланцюга ДНК і отримання гену проінсуліну. 4. Нарощування на кінцях гена тетрануклетидів цитидилу “липкі кінці”. 5. Розрізання рестриктазою гена пеніцилінази (цей ензим відповідає за стійкість до пеніциліну) в плазміді PBR-382. 6. Нарощування гуанілових “липких кінців” на розрізаних кінцях гена плазміди. 7. Вмонтовування гена проінсуліну в плазміду. 8. Введення плазміди в E.coli. 9. Синтез проінсуліну геном, який до модифікації синтезував пеніциліназу. 10. Обробка проінсуліну трипсином для відщеплення С-пептиду. Між С-кінцями В-ланцюгів інсуліну формуються водневі зв’язки і утворюються димери інсуліну, які в присутності йонів цинку формуюють гексамери. Мономери і димери легко дифундують в кров, а гексамери погано. Інсулін-ліспро – перший рекомбінантний аналог інсуліну. В ньому поміняні місцями залишки лізину і проліну. Це зменшило формування димерів і гексамерів і не вплинуло на зв’язування гормону з рецепторами. Читайте також:
|
||||||||
|