• Гідрологія і Гідрометрія
• Господарське право
• Економіка будівництва
• Економіка природокористування
• Економічна теорія
• Земельне право
• Історія України
• Кримінально виконавче право
• Медична радіологія
• Методи аналізу
• Міжнародне приватне право
• Міжнародний маркетинг
• Основи екології
• Предмет Політологія
• Соціальне страхування
• Технічні засоби організації дорожнього руху
• Товарознавство продовольчих товарів

ІV. Обчислення результатів

ІІІ. Досліджувана проба

ІІ. Побудова калібрувального графіка

Визначення загального білка за біуретовою реакцією

Принцип методу: Білки реагують в лужному середовищі з сульфатом купру му (ІІ) з утворенням сполук, забарвлених у фіолетовий колір (біуретова реакція). Ця реакція обумовлена наявністю пептидної групи:

Комплекси купруму з білками ‑ забарвлені сполуки, що мають максимум поглинання при 540 – 580 та 615 – 670 нм. За допомогою біуретової реакції можна визначити концентрацію білка у пробі 10^-5 – 10^-4М.

І. Розчини:10%-ий розчин альбуміну; біуретовий реактив суміш КNaC₄H₄O₆, гідроксиду натрію, CuSO₄•5H₂O та КІ). Зберігають його у посудині з темного скла не більше двох тижнів.

Для побудови калібрувального графіка використовують два ряди пробірок по 4 штуки в кожному, а одну пробірку ‑ для контролю. Перший ряд пробірок використовується для розведення вихідного 10%-вого розчину альбуміну. Другий ряд пробірок використовують для проведення якісної реакції. Як контрольний розчин використовують розчин робочого біуретового реактиву. До 5,0мл робочого біуретового реактиву додають 0,1мл 0,9%-вого розчину NaCI. Калібрувальний графік будують на міліметровому папері, відкладаючи одержані дані у координатах (D,С).

До 5мл робочого розчину біуретового реактиву додають 0,1мл сироватки крові або супернатанту, перемішують, запобігаючи утворенню піни. Через 30 – 60 хвилин вимірюють оптичну густину на ФЕК в кюветі шириною 1см при довжині хвилі 540 – 560 нм (зелений світлофільтр) проти контрольного розчину.

Концентрацію білка в досліджуваній пробі (С_експ.) визначають за калібрувальним графіком або за формулою:

,

де D_експ. – поглинання досліджуваної проби; D_ст. – поглинання стандартного розчину білка;

С_ст. – концентрація в стандартному розчині білка, г%.

Читайте також:

1. Абсолютні та відності показники результатів діяльності підприємства.
2. Автододавання та автообчислення.
3. Алг W2 (ОБЧИСЛЕННЯ Y)
4. Аналіз результатів за відхиленнями
5. Аналіз результатів національного виробництва.
6. Аналіз результатів практичної діяльності Київського освітньо-методичного центру соціальної роботи
7. Аналіз рівня, динаміки та структури фінансових результатів підприємства
8. Аналіз фінансових результатів діяльності туристичних підприємств
9. Аналітичні показники динаміки та прийоми їх обчислення
10. Апробація результатів дисертації
11. Аудит доходів і результатів діяльності
12. Аудит фінансових результатів роботи підприємства

Переглядів: 674