• Гідрологія і Гідрометрія
• Господарське право
• Економіка будівництва
• Економіка природокористування
• Економічна теорія
• Земельне право
• Історія України
• Кримінально виконавче право
• Медична радіологія
• Методи аналізу
• Міжнародне приватне право
• Міжнародний маркетинг
• Основи екології
• Предмет Політологія
• Соціальне страхування
• Технічні засоби організації дорожнього руху
• Товарознавство продовольчих товарів

Алгоритм побудови калібрувального графіка для визначення загального білка сироватки крові

Серію стандартних розчинів обробляють у такий самий спосіб, як і дослідні проби. Вимірювання оптичної густини стандартних розчинів починають з менших концентрацій. Значення оптичної густини (що відповідають різним концентраціям) наносять на міліметровий папір. На осі абсцис з дотриманням однакових інтервалів рівномірно відкладають значення концентрації стандартних розчинів білка; на осі ординат – відповідні їм значення оптичної густини. Масштаб вибирають так, щоб крива була під кутом 45 °. Наносять середнє значення екстинкції з декількох визначень і через отримані точки, а подекуди і між ними проводять пряму лінію (рис. 2.8).

Рис. 2.8.Калібрувальна крива для визначення концентрації білка біуретовим методом

Нормальні значення концентрації загального білка маса/об’єм, або г/100 мл: у сироватці крові дорослих становлять 6,5–8,5, у дітей до шести років – 5,6–7,8, у немовлят – 5,3–6,8; у сечі – 25–70 мг/добу; у лікворі – 15–45 мг/100 мл.

Примітка. Калібрувальна крива за біуретовим методом відображає лінійну залежність до Е = 0,5 (близько 10 г/100 мл), що збігається з даними інших авторів.

Якщо концентрація білка у сироватці перевищує 10 г/100 мл, її розводять фізіологічним розчином (зазвичай дворазово), в реакцію беруть 0,1 мл суміші, а отриманий результат множать на коефіцієнт розведення, який дорівнює двом. Усі реактиви, які використовують у методиці, готують на дистильованій воді.

Визначення концентрації білка за методом Лоурі

Принцип методу. В основі визначення концентрації білка цим методом є здатність Купрум похідних білка відновлювати реактив Фоліна з утворенням забарвлених продуктів реакції. Метод широко застосовують не тільки для визначення концентрації білка у біологічних рідинах, а й для серійних аналізів фракцій на вміст білка після розділення складних сумішей хроматографічними методами. Важливо пам’ятати, що позитивну реакцію Фоліна дають відновники – аскорбінова кислота, глутатіон і навіть глюкоза.

Обладнання. Фотоелектроколориметр або спектрофотометр, штатив з пробірками, піпетки.

Читайте також:

1. I визначення впливу окремих факторів
2. II. Визначення мети запровадження конкретної ВЕЗ з ураху­ванням її виду.
3. II. Мотивація навчальної діяльності. Визначення теми і мети уроку
4. Ocнoвнi визначення здоров'я
5. Rete-алгоритм
6. S Визначення оптимального темпу роботи з урахуванням динаміки наростання втоми.
7. Абсолютний фагоцитоз або елімінуюча здатність крові (ЕЗК) — це кількість фагоцитованих мікробних клітин лейкоцитами 1 мкл крові.
8. Адаптація крові до фізичних навантажень
9. Аксіоматичний метод у математиці та суть аксіоматичної побудови теорії.
10. Алгебраїчний спосіб визначення точки беззбитковості
11. Алгоритм
12. Алгоритм

Переглядів: 3210