• Гідрологія і Гідрометрія
• Господарське право
• Економіка будівництва
• Економіка природокористування
• Економічна теорія
• Земельне право
• Історія України
• Кримінально виконавче право
• Медична радіологія
• Методи аналізу
• Міжнародне приватне право
• Міжнародний маркетинг
• Основи екології
• Предмет Політологія
• Соціальне страхування
• Технічні засоби організації дорожнього руху
• Товарознавство продовольчих товарів

Визначення концентрації гемоглобіну

Принцип методу. Ціанметгемоглобіновий фотоелектроколориметричний метод ґрунтується на тому, що під впливом калій залізосинеродистого гемоглобін крові окиснюється в метгемоглобін (геміглобін), який утворює з ацетонціангідрином забарвлену речовину – геміглобінціанід – речовину стійку, інтенсивність забарвлення якої пропорційна вмістові гемоглобіну. Концентрацію ціанметгемоглобіну вимірюють фотометрично.

Обладнання. Вата, скарифікатори, штатив з пробірками, піпетки, груші, дозатори, годинник, рукавички.

Реактиви

Для переведення гемоглобіну в ціанметгемоглобін використовують або реактив Драбкіна, або трансформувальний розчин.

1. Розчин Драбкіна: NаНСО₃ – 1 г; КСN – 0,05 г; К₃[Fe(CN)₆] – 0,2 г; дистильованої води – до 1,0 л.

2. Траноформувальний розчин такого складу: NаНСО₃ – 1г; ацетоноціангідрину – 0,5 мл; К₃[Fe(CN)₆] – 0,2 г; дистильованої води – до 1 л.

Хід роботи

Проколюють шкіру пальця. Першу краплю знімають. Капіляр або піпетку Салі промивають фізіологічним розчином, потім ретельно видувають залишки цього розчину. Набирають 0,02 мл крові і вносять у пробірку з 5 мл трансформувального розчину, капіляр промивають два-три рази верхнім шаром розчину, перемішують і залишають на 20 хв. Найчастіше використовують співвідношення 1:250 (0,02 мл цільної крові і 5 мл реактиву).

Паралельно можна ставити одну стандартну пробу з концентрацією 150 г/л – для внутрішньо лабораторного контролю та перевірки метрологічної відповідності вимірювань.

Екстинкцію вимірюють через 20 хв, які потрібні для повного перетворення гемоглобіну в ціанметгемоглобін, при довжині хвилі 540 нм (зелений світлофільтр) у кюветі шириною 10 мм проти контролю – трансформувального розчину чи дистильованої води на спектрофотометрі чи фотоелектроколориметрі.

Отриманий показник оптичної густини (Е₅₄₀) множать на коефіцієнт 36,77 і обчислюють концентрацію гемоглобіну у грам-процентах (г%):

С_Нв = Е₅₄₀ × 36,77.

Нормальні значення.Згідно з новою Міжнародною системою одиниць (СІ), концентрація гемоглобіну вимірюється у грамах на літр (г/л). Норми вмісту гемоглобіну для жінок: 120–140 г/л (12–14 г%); для чоловіків: 130–160 г/л (13–16 г%).

Є ще одна розмірність – умовні одиниці. Було прийнято “ідеальну” концентрацію гемоглобіну, що дорівнює 16,67 г%, за 100 умовних одиниць (у.о.). На підставі цього співвідношення переводять одні розмірності в інші.

Приклад розрахунку. Як виразити 14 г% в умовних одиницях ?

16,67 г% – 100 у.о.;

14,00 г% – х у.о.;

х = 84 у.о.

Читайте також:

1. I визначення впливу окремих факторів
2. II. Визначення мети запровадження конкретної ВЕЗ з ураху­ванням її виду.
3. II. Мотивація навчальної діяльності. Визначення теми і мети уроку
4. Ocнoвнi визначення здоров'я
5. S Визначення оптимального темпу роботи з урахуванням динаміки наростання втоми.
6. Алгебраїчний спосіб визначення точки беззбитковості
7. Алгоритм побудови калібрувального графіка для визначення загального білка сироватки крові
8. Алгоритм побудови калібрувального графіка для визначення загального білка сироватки крові
9. Аналіз існуючих виробів та визначення завдань проекту
10. Аналіз службового призначення деталей та конструктивних елементів обладнання харчових виробництві, визначення технічних вимог і норм точності при їх виготовленні
11. Аналіз стратегічних альтернатив та визначення оптимальної стратегії формування фінансових ресурсів
12. Аналіз ступеня вільності механізму. Наведемо визначення механізму, враховуючи нові поняття.

Переглядів: 897