МАРК РЕГНЕРУС ДОСЛІДЖЕННЯ: Наскільки відрізняються діти, які виросли в одностатевих союзах
РЕЗОЛЮЦІЯ: Громадського обговорення навчальної програми статевого виховання ЧОМУ ФОНД ОЛЕНИ ПІНЧУК І МОЗ УКРАЇНИ ПРОПАГУЮТЬ "СЕКСУАЛЬНІ УРОКИ" ЕКЗИСТЕНЦІЙНО-ПСИХОЛОГІЧНІ ОСНОВИ ПОРУШЕННЯ СТАТЕВОЇ ІДЕНТИЧНОСТІ ПІДЛІТКІВ Батьківський, громадянський рух в Україні закликає МОН зупинити тотальну сексуалізацію дітей і підлітків Відкрите звернення Міністру освіти й науки України - Гриневич Лілії Михайлівні Представництво українського жіноцтва в ООН: низький рівень культури спілкування в соціальних мережах Гендерна антидискримінаційна експертиза може зробити нас моральними рабами ЛІВИЙ МАРКСИЗМ У НОВИХ ПІДРУЧНИКАХ ДЛЯ ШКОЛЯРІВ ВІДКРИТА ЗАЯВА на підтримку позиції Ганни Турчинової та права кожної людини на свободу думки, світогляду та вираження поглядів
Контакти
Тлумачний словник Авто Автоматизація Архітектура Астрономія Аудит Біологія Будівництво Бухгалтерія Винахідництво Виробництво Військова справа Генетика Географія Геологія Господарство Держава Дім Екологія Економетрика Економіка Електроніка Журналістика та ЗМІ Зв'язок Іноземні мови Інформатика Історія Комп'ютери Креслення Кулінарія Культура Лексикологія Література Логіка Маркетинг Математика Машинобудування Медицина Менеджмент Метали і Зварювання Механіка Мистецтво Музика Населення Освіта Охорона безпеки життя Охорона Праці Педагогіка Політика Право Програмування Промисловість Психологія Радіо Регилия Соціологія Спорт Стандартизація Технології Торгівля Туризм Фізика Фізіологія Філософія Фінанси Хімія Юриспунденкция |
|
|||||||
Реактиви1. Етиловий спирт – 70 º розчин. 2. Фізіологічний розчин – 0,9 % розчин натрій хлориду. 3. Натрій цитрат – 5 % розчин. 4. Натрій гідроксид – 0,1 н розчин (рН 12,7), зберігають у запарафінованій пляшці в холодильнику. 5. Амоній сульфат – 50 % розчин: до 100 мл розчину (NН4)2S04 додають 0,85 мл концентрованої хлоридної кислоти. 6. Аміак – 0,04 % розчин: 0,40 мл 25 % аміаку доводять до 25 мл дистильованою водою. Хід роботи Отримують кров шляхом скарифікації шкіри пальця. Готують цитратну кров: до 500 мкл крові додають 50 мкл 5 % розчину натрій цитрату (правильне співвідношення крові і антикоагулянту (в даному випадку натрій цитрату) 10:1. Кров з антикоагулянтом переносять у центрифужні пробірки. Якщо об’єм крові невеликий (від 0,2 до 0,5 мл), то можна проводити центрифугування в пробірках типу Еппендорф. Еритроцити відділяють від плазми крові шляхом центрифугування при 3 000 об/хв протягом 5 хв. Верхній шар (плазма) відсмоктують пастерівською піпеткою або за допомогою шприца з довгою голкою і виливають. Еритроцити тричі промивають охолодженим фізіологічним розчином (0,9 % розчин натрій хлористого) при 3 000 об/хв по 5 хв. Відмиті еритроцити гемолізують дистильованою водою у співвідношенні 1:2 (еритроцитарна маса : дистильована вода). Суміш перемішують протягом 10 хв і центрифугують 10 хв при 8 000 об/хв для відділення стром еритроцитів. За допомогою шприца з довгою голкою відбирають супернатант (гемолізат) і переносять в чисту пробірку Еппендорф. До 0,2 мл водного розчину гемолізату додають 1,8 мл 0,1 н NаОН і секундоміром фіксують час 1 хв. Через 1 хв проводять осадження, додаючи 4,0 мл 50 % розчину амоній сульфату. Відразу після цього суміш добре перемішують і фільтрують через подвійний знезолений фільтр. На фільтрі залишається гемоглобін А, а фільтрат містить гемоглобін F, який визначають спектрофотометрично при довжині хвилі 541 нм. Контрольну пробу, за якою обчислюють загальний вміст гемоглобінів (А + F), готують так: до 0,1 мл гемолізату додають 5,9 мл 0,04 %розчину NН4ОН і міряють екстинкцію при довжині хвилі 541 нм. Процент гемоглобіну F розраховують за формулою: де Е1 – екстинкція досліджуваного розчину після осадження гемоглобіну А; Е2 – екстинкція контрольної проби; 2 – коефіцієнт для порівняння концентрацій. § Метод К. Зінгера у модифікації Н. О. Сибірної Обладнання. Вата, скарифікатори, штатив з пробірками, піпетки, груші, дозатори, годинник, центрифуга, центрифужні пробірки, пробірки типу Еппендорф, знезолений фільтр, лійка, рукавички. Читайте також:
|
||||||||
|