МАРК РЕГНЕРУС ДОСЛІДЖЕННЯ: Наскільки відрізняються діти, які виросли в одностатевих союзах
РЕЗОЛЮЦІЯ: Громадського обговорення навчальної програми статевого виховання ЧОМУ ФОНД ОЛЕНИ ПІНЧУК І МОЗ УКРАЇНИ ПРОПАГУЮТЬ "СЕКСУАЛЬНІ УРОКИ" ЕКЗИСТЕНЦІЙНО-ПСИХОЛОГІЧНІ ОСНОВИ ПОРУШЕННЯ СТАТЕВОЇ ІДЕНТИЧНОСТІ ПІДЛІТКІВ Батьківський, громадянський рух в Україні закликає МОН зупинити тотальну сексуалізацію дітей і підлітків Відкрите звернення Міністру освіти й науки України - Гриневич Лілії Михайлівні Представництво українського жіноцтва в ООН: низький рівень культури спілкування в соціальних мережах Гендерна антидискримінаційна експертиза може зробити нас моральними рабами ЛІВИЙ МАРКСИЗМ У НОВИХ ПІДРУЧНИКАХ ДЛЯ ШКОЛЯРІВ ВІДКРИТА ЗАЯВА на підтримку позиції Ганни Турчинової та права кожної людини на свободу думки, світогляду та вираження поглядів
Контакти
Тлумачний словник Авто Автоматизація Архітектура Астрономія Аудит Біологія Будівництво Бухгалтерія Винахідництво Виробництво Військова справа Генетика Географія Геологія Господарство Держава Дім Екологія Економетрика Економіка Електроніка Журналістика та ЗМІ Зв'язок Іноземні мови Інформатика Історія Комп'ютери Креслення Кулінарія Культура Лексикологія Література Логіка Маркетинг Математика Машинобудування Медицина Менеджмент Метали і Зварювання Механіка Мистецтво Музика Населення Освіта Охорона безпеки життя Охорона Праці Педагогіка Політика Право Програмування Промисловість Психологія Радіо Регилия Соціологія Спорт Стандартизація Технології Торгівля Туризм Фізика Фізіологія Філософія Фінанси Хімія Юриспунденкция |
|
|||||||
Реактиви1. Натрій цитрат – 5 % розчин або будь-який інший антикоагулянт. 2. Фізіологічний розчин – 0,85 % розчин натрій хлориду. 3. Фосфатний буфер – 0,1 М розчин, рН 7,4: для приготування буфера готують два розчини солей натрій фосфату. Розчин А – 7,8 г однозаміщеного натрій фосфату (NаН2РО4 × Н2О) доводять дистильованою водою до 500 мл; розчин В– 7,1 г двозаміщеного натрій фосфату (Nа2НРО4) доводять дистильованою водою до 500 мл. Змішують 19,2 мл розчину “А” і 80,8 мл розчину “В”, рН розчину доводять до 7,4. 4. Аміак – 0,04 % розчин (NН4ОН): 0,40 мл 25 % аміаку доводять до 25 мл дистильованою водою. Хід роботи Готують цитратну кров: до 0,1 мл крові додають 0,01 мл 5,0 % розчину натрій цитрату. Кров з антикоагулянтом переносять у пробірки типу Еппендорф. Еритроцити відділяють від плазми крові шляхом центрифугування цитратної крові в пробірках типу Еппендорф при 3 000 об/хв протягом 5 хв. Верхній шар плазми відсмоктують за допомогою шприца з довгою голкою і виливають. Еритроцити з 0,1 мл цитратної крові відмивають двічі у 1,0 мл фізіологічного розчину. До осаду відмитих еритроцитів додають 0,5 мл дистильованої води і перемішують. Додають 0,5 мл 0,1 М фосфатного буфера (рН 7,4) і перемішують. Центрифугують 10 хв при 3 000 об/хв. Із супернатанту відбирають 0,2 мл забуференого гемолізату і вносять у пробірку з 3,4 мл 0,04 % розчину аміаку. Після перемішування визначають оптичну густину на спектрофотометрі у 10 мм кюветі при довжині хвилі 540 нм. Контрольним розчином є аміак. Дані цієї екстинкції (Е1) до інкубації приймають за 100 % гемоглобіну. Забуферений гемолізат у кількості 0,5 мл інкубують у водяній бані при температурі +55 °С протягом 1 год, після чого центрифугують 10 хв при 3 000 об/хв. Із супернатанту відбирають 0,2 мл і вносять його у пробірку з 3,4 мл 0,04 % розчину аміаку. При довжині хвилі 540 нм визначають екстинкцію розчину Е2. Дані цієї екстинкції відповідають термостабільному гемоглобіну. Вміст термостабільного гемоглобіну вираховують за формулою: де Х – відсоток термостабільного гемоглобіну (у нормі, на його частку припадає 90–92 % і більше). Процент термолабільної фракції становить 100 % – х.
Читайте також:
|
||||||||
|