• Гідрологія і Гідрометрія
• Господарське право
• Економіка будівництва
• Економіка природокористування
• Економічна теорія
• Земельне право
• Історія України
• Кримінально виконавче право
• Медична радіологія
• Методи аналізу
• Міжнародне приватне право
• Міжнародний маркетинг
• Основи екології
• Предмет Політологія
• Соціальне страхування
• Технічні засоби організації дорожнього руху
• Товарознавство продовольчих товарів

Визначення вмісту глікозильованого гемоглобіну

Принцип методу.

Обладнання. Штатив з пробірками, піпетки, груші, дозатори, годинник, центрифуга, центрифужні пробірки, пробірки типу Еппендорф, рукавички, спектрофотометр чи фотоелектроколориметр.

Реактиви

1. Щавлева кислота – 0,3 М розчин (молекулярна маса – 90,04): зважують 27 г і доводять об’єм розчину до 1 л.

2. Тіобарбітурова кислота – 0,05 М розчин (молекулярна маса – 144,2): 720 мг тіобарбітурової кислоти розчиняють у дистильованій воді і доводять об’єм до 100 мл.

3. Трихлороцтова кислота – 40% розчин: 40 г трихлороцтової кислоти розчиняють у дистильованій воді і доводять об’єм до 100 мл.

Хід роботи

Для приготування проби необхідно 3–5 мл гепаринізованої венозної крові, яку центрифугують 15 хв при 3 000 об/хв. Відбирають плазму, а еритроцитарну масу тричі промивають фізіологічним розчином, центрифугуючи протягом 5 хв при 3 000 об/хв. Відмиті еритроцити гемолізують дистильованою водою у співвідношені 1:3 і центрифугують 15 хв при 18 000 об/хв. Другий етап досліду – одержання супернатанту. Для цього до 2 мл еритроцитарної маси додають 1 мл 0,03 М розчину щавлевої кислоти. Потім суміш інкубують при 100 °С протягом 1 год, охолоджують і додають 1 мл 40 % розчину трихлороцтової кислоти, обов’язково перемішують і центрифугують 10 хв при 3 000 об/хв.

Далі 2 мл супернатанту змішують з 0,5 мл 0,05 М розчину тіобарбітурової кислоти і суміш інкубують при 40 °С протягом 40 хв. Через 20 хв після закінчення інкубації визначають оптичну густину в 10 мм кюветах проти дистильованої води при довжині хвилі 443 нм. Оптична густина 0,029 відповідає 1 % глікозильованого гемоглобіну.

Читайте також:

1. I визначення впливу окремих факторів
2. II. Визначення мети запровадження конкретної ВЕЗ з ураху­ванням її виду.
3. II. Мотивація навчальної діяльності. Визначення теми і мети уроку
4. Ocнoвнi визначення здоров'я
5. S Визначення оптимального темпу роботи з урахуванням динаміки наростання втоми.
6. Алгебраїчний спосіб визначення точки беззбитковості
7. Алгоритм побудови калібрувального графіка для визначення загального білка сироватки крові
8. Алгоритм побудови калібрувального графіка для визначення загального білка сироватки крові
9. Аналіз існуючих виробів та визначення завдань проекту
10. Аналіз службового призначення деталей та конструктивних елементів обладнання харчових виробництві, визначення технічних вимог і норм точності при їх виготовленні
11. Аналіз стратегічних альтернатив та визначення оптимальної стратегії формування фінансових ресурсів
12. Аналіз ступеня вільності механізму. Наведемо визначення механізму, враховуючи нові поняття.

Переглядів: 567