• Гідрологія і Гідрометрія
• Господарське право
• Економіка будівництва
• Економіка природокористування
• Економічна теорія
• Земельне право
• Історія України
• Кримінально виконавче право
• Медична радіологія
• Методи аналізу
• Міжнародне приватне право
• Міжнародний маркетинг
• Основи екології
• Предмет Політологія
• Соціальне страхування
• Технічні засоби організації дорожнього руху
• Товарознавство продовольчих товарів

За методом Н.В. Клімінкіної і С.І. Плітмана

Завдання. Провести кількісне визначення гістаміну в крові.

Принцип. Метод базується на взаємодії гістаміну з діазотованим п-нітроаніліном з утворенням сполук оранжево-червоного кольору.

Хід роботи. Кров, з якої осаджені білки 10% розчином трихлороцтової кислоти, для екстракції гістаміну витримують у холодильнику протягом доби, фільтрують через паперовий фільтр. В одну пробірку відмірюють 2 мл фільтрату (дослід), у другу – 0,2 мл стандартного 200 мкмоль/л розчину гістаміну і 1,8 мл води (стандарт). В обидві пробірки додають по 3 мл води і 1 мл 4% натрію нітрату. Пробірки ретельно струшують і кип’ятять на водяній бані 2 хв, потім охолоджують під струменем водопровідної води і додають по 1 мл діазотованого п-нітроаніліну (готують перед застосуванням з 0,1% п-нітроаніліну в 0,1 моль/л хлоридній кислоті, додаючи до 10 мл охолодженого розчину 1 мл 4% натрію нітрату). Ретельно перемішують проби і доводять їх рН до 10,0 за універсальним папером, додаючи 1,5 мл, а потім 0,5 мл 20% натрію карбонату. Вміст пробірок перемішують, охолоджують під струменем водопровідної води і додають 2-3 краплі 20% натрію гідроксиду до розвитку забарвлення. Екстинкцію дослідної і стандартної проб вимірюють на ФЕК при довжині хвилі 520-540 нм (зелений світлофільтр) у кюветі з товщиною шару 5 мм проти контролю. Вміст гістаміну (Х) у мкмоль/л розраховують за формулою: Х=(Едосл.×200)/Ест., де Едосл. – екстинкція дослідного розчину; Ест. – екстинкція стандартного розчину; 200 – концентрація стандартного розчину гістаміну, мкмоль/л.

Клініко-діагностичне значення. Гістамін - біологічно активна речовина, що бере участь в регуляції життєвих функцій організму. Викликає розширення судин на місці запалення та тим самим прискорює надходження лейкоцитів, що сприяє активації захисних сил організму; має безпосереднє відношення до розвитку алергічних та імунних реакцій, процесів сенсибілізації і десенсибілізації; виконує роль медіатора болі. За звичайних умов гістамін знаходиться переважно в неактивному (зв’язаному) стані. У крові здорової людини його концентрація становить 0,02-0,04 мкмоль/л. При деяких патологічних процесах (анафілактичний шок, опіки, відмороження, сінна гарячка та інші алергенні захворювання), а також при надходженні до організму хімічних речовин, у тому числі лікарських препаратів, кількість вільного гістаміну збільшується. Гістамін викликає спазм непосмугованої мускулатури, розширення судин і зниження артеріального тиску; у зв’язку із застоєм крові в капілярах і збільшенням проникності їх стінок має місце набряк оточуючих тканин і згущення крові.

У клініко-біохімічних лабораторіях визначення вмісту деяких біогенних амінів має діагностичне значення. При тяжкому нефросклерозі підвищується вміст у плазмі крові тираміну, у випадку шоку – серотоніну, при алергічних захворюваннях - гістаміну.

Читайте також:

1. VII. Нахождение общего решения методом характеристик
2. Аналіз причин виникнення проблеми та обґрунтування її розв’язання програмним методом
3. Аналіз фінансової звітності методом коефіцієнтів
4. Банку за методом кумулятивного гепу, (тис. грн.)
5. Введення проводок методом копіювання
6. Виділення чистих культур за методом Коха
7. Визначення вмісту загального та білкового азоту за методом Кьєльдаля
8. Визначення загального азоту в сечі за методом Кьєльдаля.
9. Визначення загального вмісту органічних та мінеральних фосфатів ґрунту методом прокалювання Сендерса -Вільямса
10. Визначення йодного числа жиру методом Війса.
11. Визначення йодного числа жиру прискореним методом (методом Маргошеса).
12. Визначення йодного числа методом Гюбля.

Переглядів: 283