• Гідрологія і Гідрометрія
• Господарське право
• Економіка будівництва
• Економіка природокористування
• Економічна теорія
• Земельне право
• Історія України
• Кримінально виконавче право
• Медична радіологія
• Методи аналізу
• Міжнародне приватне право
• Міжнародний маркетинг
• Основи екології
• Предмет Політологія
• Соціальне страхування
• Технічні засоби організації дорожнього руху
• Товарознавство продовольчих товарів

Кількісне визначення залишкового нітрогену в крові

Завдання.Визначити вміст залишкового нітрогену в крові.

Принцип. Метод базується на здатності амоніаку, що утворюється внаслідок мінералізації безбілкових нітрогенвмісних сполук крові, давати з реактивом Несслера сполуку жовтого кольору, інтенсивність якої пропорційна концентрації залишкового нітрогену.

Хід роботи. У центрифужну пробірку наливають 0,5 мл води та 0,2 мл крові, додають 1,3 мл 10% розчину трихлороцтової кислоти. Перемішують скляною паличкою і залишають осаджуватися білки протягом 20 хв, потім центрифугують 10 хв при швидкості 3000 об/хв. Переливають надосадову рідину в чисту пробірку, з неї відбирають 1 мл безбілкового центрифугату в іншу пробірку, додають до нього 3 краплі концентрованої сульфатної кислоти і 2 краплі 30% розчину гідрогену пероксиду. Ставлять пробірку приблизно на 30 хв на піщану баню для мінералізації (до повного прояснення розчину). Після охолодження пробірки до кімнатної температури до неї вливають 10 мл води, ретельно знімають зі стінок мінералізат скляною паличкою і перемішують. Додають у пробірку по 0,5 мл розчину 0,4 моль/л натрію гідроксиду і реактиву Несслера. Після появи жовтого забарвлення фотометрують дослідну пробу проти контрольної (20 мл води і 1 мл реактиву Несслера) на ФЕК при довжині хвилі 610-650 нм (червоний світлофільтр) у кюветі з товщиною шару 20 мм. Розрахунок в г/л проводять за формулою: (m×2×5000)/(1×1000) = m×10, де m – вміст нітрогену в пробі, знайдений за калібрувальним графіком (мг); 5000 – коефіцієнт перерахунку на 1 л крові; 2 – об’єм трихлороцтового екстракту (мл); 1 – об’єм безбілкового центрифугату, взятого на аналіз (мл).

Клініко-діагностичне значення.До складу залишкового нітрогену входять нітроген сечовини, пептидів, амінокислот, амоніаку та інших нітрогенвмісних низькомолекулярних сполук. У здорової людини вміст залишкового нітрогену в крові коливається в межах 14-25 ммоль/л. Підвищення його рівня (нітрогенемія, азотемія) буває абсолютним і відносним. Абсолютна азотемія спричиняється затримкою нітрогенових шлаків або збільшенням їх утворення в організмі; відносна – спостерігається при зневодненні організму (посилене потовиділення, нестримне блювання, діарея та ін.). Розрізняють ниркову та позаниркову азотемію. Перша спостерігається при порушенні видільної здатності нирок (гострі і хронічні нефрити, гломерулонефрити), причому рівень азотемії відповідає тяжкості патологічного процесу. Позаниркова – є наслідком підвищеного розпаду білків в організмі при гарячці, опіках, діабеті, тяжких ураженнях печінки тощо.

Читайте також:

1. CMM. Визначення моделі зрілості.
2. I визначення впливу окремих факторів
3. II. Визначення мети запровадження конкретної ВЕЗ з ураху­ванням її виду.
4. II. Мотивація навчальної діяльності. Визначення теми і мети уроку
5. Ocнoвнi визначення здоров'я
6. S Визначення оптимального темпу роботи з урахуванням динаміки наростання втоми.
7. А. Визначення розмірів і площі зони хімічного зараження.
8. Абсолютний фагоцитоз або елімінуюча здатність крові (ЕЗК) — це кількість фагоцитованих мікробних клітин лейкоцитами 1 мкл крові.
9. Адаптація крові до фізичних навантажень
10. Алгебраїчний спосіб визначення точки беззбитковості
11. Алгоритм визначення проекцій точок на поверхнях обертання
12. Алгоритм побудови калібрувального графіка для визначення загального білка сироватки крові

Переглядів: 592