ЛАБОРАТОРНА РОБОТА №3.

1. Приготування розчину фікол-верографіну (ρ = 1,077 г/мл):

1.1. Приготування розчину фіколу:

9 г фіколу (порошку) ретельно розчинити в 100 мл гарячої дистильованої води при постійному перемішуванні. Одержану суміш вилити в пляшку коричневого скла. Зберігати в холодильнику за температури 8 – 10ºС не більше 7 діб.

1.2. Приготування робочого розчину верографіну (33,9%):

60% розчин верографіну + 7,7 мл дист. води

76% розчин верографіну + 12,48 мл дист. води.

Зберігати в холодильнику за температури 8 – 10ºС не більше 7 діб.

1.3. Приготування градієнту фікол-верографіну (ρ = 1,077 г/мл):

24 мл фіколу + 10 мл верографіну (Важливо! Фікол наливати у верографін). Одержану суміш вилити в пляшку коричневого скла. Зберігати в холодильнику за температури 8 – 10ºС не більше 7 діб.

2. Приготування Т-системи. Відмити еритроцити барана (ЕБ) 199 середовищем 3 рази (центрифугуванням по 10 – 15 хв при 1000 об/хв). Надосадову рідину злити. В пробірку об’ємом 10 см³ додати 5 мл середовища 199 та 0,025 мл відмитих центрифугуванням еритроцитів барана. Одержану Т-систему добре перемішати, пробірку закрити гумовою або ватно-марлевою пробкою. Зберігати в холодильнику за температури 6 – 8ºС одну добу.

3. Приготування В-системи.

3.1. Приготування еритроцитів барана. Відмити еритроцити барана (ЕБ) 199 середовищем 3 рази (центрифугуванням по 10 – 15 хв при 1000 об/хв). Надосадову рідину злити.

3.2. Приготування гемолітичної системи. До пробірки №1 внести 3 мл середовища 199 та 0,01 мл гемолітичної сироватки, добре перемішати. До пробірки №2 внести 5 мл середовища 199 та 0,1 мл відмитих еритроцитів барана, обережно перемішати. Вміст пробірки №1 перелити в пробірку №2 (біле в червоне).

3.3. Змішати в однакових кількостях еритроцити барана та гемолітичну систему: 3 мл ЕБ + 3 мл гем. системи. Одержану зависину поставити на 30 хв в термостат за температури 37°С. Через 30 хв одержану суміш дістати з термостату і відмити 3 рази середовищем 199 (центрифугуванням по 10 – 15 хв при 1000 об/хв).

3.4. Надосадову рідину злити, до осаду додати 0,3 мл мишачої сироватки і довести об’єм середовищем 199 до 6 мл. Одержану В-систему добре перемішати, пробірку закрити гумовою або ватно-марлевою пробкою. Зберігати в холодильнику за температури 6 – 8ºС одну добу.

4. Робочий розчин барвника Романовського-Гімзе: концентрований барвник Романовського-Гімзе розвести – 2 краплини барвника на 1 мл дист. води. Розчин приготувати в день проведення занять.

Читайте також:

<== попередня сторінка	\|	наступна сторінка ==>
ЛАБОРАТОРНА РОБОТА №2.	\|	ЛАБОРАТОРНА РОБОТА №4.

Не знайшли потрібну інформацію? Скористайтесь пошуком google:

Генерація сторінки за: 0.006 сек.