Кількісне визначення оксиду вуглецю(ІІ) в крові.

Вміст оксиду вуглецю(ІІ) в крові визначають за кількістю карбоксигемоглобіну. З цією метою був використаний СПФ-метод, який запропонували Крамаренко В.П., Собчук Б.А., Гладишевська Т.М. в 1974 році.

Відомо, що оксид вуглецю(ІІ), потрапляючи в організм, сполучається з дезокси- і оксигемоглобіном з утворенням карбоксигемоглобіну.

В організмі метгемоглобін не сполучається з оксидом вуглецю(ІІ), але в лабораторних умовах при дії дитіоніту Na – Na₂S₂O₃·2H₂O (гідросульфіт натрію) метгемоглобін можна перевести в дезоксигемоглобін.

Усі форми гемоглобіну (дезоксигемоглобін, оксигемоглобін, карбоксигемоглобін, метгемоглобін) можна виявити за їхніми спектрами поглинання у видимій ділянці в інтервалі довжин хвиль від 450 до 620 нм.

Спектри поглинання оксигемоглобіну і карбоксигемоглобіну мало відрізняється один від одного.

У зв’язку з цим спектральні характеристики оксигемоглобіну і карбоксигемоглобіну не використовуються. Значно відрізняються один від одного спектри поглинання дезоксигемоглобіну і карбоксигемоглобіну. Тому ці спектри і використовують при кількісному визначенні карбоксигемоглобіну в крові.

Для кількісного СПФ-го визначення СО виготовляють ряд розчинів:

Розчин А – розчин досліджуваної крові.

Розчин Б – розчин крові, в якому знаходиться карбоксигемоглобін і дезоксигемоглобін.

Розчин В – розчин крові, в якому всі форми гемоглобіну(дезоксигемоглобін Hb, оксигемоглобін OHb, метгемоглобін MtHb– повністю переведені в карбоксигемоглобін).

Дезоксигемоглобін має максимум поглинання при 557 нм. Карбоксигемоглобін має 2 максимуми поглинання при 541 і 571 нм. При накладанні спектральних кривих карбоксигемоглобіну і дезоксигемоглобіну на один графік спостерігається поява трьох ізобестичних точок при λ – 550, 565, 580 нм.

У цих ізобестичних точках(а, б, в), які є точками перетину спектральних кривих дезоксигемоглобіну і карбоксигемоглобіну, оптичні густини обох зазначених форм гемоглобіну однакові (рис.1).

Приступаючи до вимірювання оптичної густини досліджуваних розчинів крові, потрібно знайти довжину хвилі, при якій біля першого максимуму поглинання карбоксигемоглобіну(541нм) віддаль між його спектральною кривою і спектральною кривою дезоксигемоглобіну є найбільшою. На основі спектральних даних встановлена довжина хвилі 538нм.

Похибка визначення COHb в межах концентрацій від 3% до 20% становить ±3%. При концентраціях понад 20% похибка зростає до ±5%.

Рис 1. Спектри поглинання карбоксигемоглобіну(1) і дезоксигемоглобіну(2)

На основі результатів вимірювання оптичної густини розчинів крові Б і В обчислюють вміст карбоксигемоглобіну у відсотках (Р) у досліджуваній крові, користуючись формулою:

Читайте також:

<== попередня сторінка	\|	наступна сторінка ==>
Хімічні методи виявлення оксиду вуглецю(ІІ) в крові.	\|	Тема: Соціологія як наука про суспільство

Не знайшли потрібну інформацію? Скористайтесь пошуком google:

Генерація сторінки за: 0.004 сек.